黑色素瘤細(xì)胞株在培養(yǎng)瓶長成致密單層后，已基本上飽和，為使細(xì)胞株能繼續(xù)生長，同時也將細(xì)胞株數(shù)量擴(kuò)大，就必須進(jìn)行傳代（再培養(yǎng)）。傳代培養(yǎng)也是一種將細(xì)胞株種保存下去的方法。同時也是利用培養(yǎng)黑色素瘤細(xì)胞株進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)的必經(jīng)過程。懸浮型黑色素瘤細(xì)胞株直接分瓶就可以，而貼壁細(xì)胞株需經(jīng)消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶（比如胰蛋白酶）消化貼壁細(xì)胞株成單個細(xì)胞株，也可加入乙二胺四乙酸（EDTA）提高消化能力，EDTA 是一種二價離子的螯合劑，能抑制黑色素瘤細(xì)胞株膜上的Ca2+和Mg2+。常用的細(xì)胞株消化液一般含有0.25%(w/v)的胰酶和0.03% (w/v) EDTA，一般用不含Ca2+和Mg2+的鹽溶液配置，先用胰酶-EDTA 消化液清洗細(xì)胞株（5.0 -10.0 ml/75cm），然后棄去消化液，重新加入少量的胰酶-EDTA 消化液(2.0 to 5.0 ml/75 sq. cm flask) ，觀察細(xì)胞株直到細(xì)胞株變圓脫離瓶壁，此過程一般需要5-15分鐘，為了避免細(xì)胞株成團(tuán)，消化黑色素瘤細(xì)胞株的過程中不要拍打細(xì)胞株瓶。對于特別難消化的細(xì)胞株，可以加入胰酶EDTA 消化液后把細(xì)胞株置于37°C 促進(jìn)消化，細(xì)胞株脫離瓶壁后，立刻加入含有血清的*培養(yǎng)基中止消化，血清中某些蛋白質(zhì)能夠抑制胰酶的活性。一般情況下，離心并不需要。如果黑色素瘤細(xì)胞株需要無血清或者低血清的培養(yǎng)基，可以以125000g 轉(zhuǎn)速離心5分鐘，然后棄去中止用的培養(yǎng)基，加入適合的新的培養(yǎng)基輕輕混勻細(xì)胞株，移入到新的培養(yǎng)瓶。傳代的比例視細(xì)胞株類型而定，一般是1:2-1:20，具體比例可參考說明書。胰蛋白酶會對某些細(xì)胞株的黑色素瘤細(xì)胞株膜產(chǎn)生損傷，對于這種類型的細(xì)胞株，可用細(xì)胞株刮輕輕刮下細(xì)胞株，加入適量的培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻細(xì)胞株，然后進(jìn)行傳代培養(yǎng)。